Криоконсервация ембриони за еко

В съвременното развитие на медицинската технология допринася за разработването на нови подходи за лечение на безплодие. Така че използва широко в клиничната практика, получих един от методите за подпомагане на репродуктивните технологии - криоконсервация на сперма, ембриони, яйцеклетки. В тази статия ще разгледаме нова модерна вид подготовка за оплождане на ембриони или сперма с помощта на дълбоко замразени с течен азот.

Видео: Ембрионна криоконсервация

Този метод до известна степен допринася за решаване на проблемите на опазването и бъдещо използване на биологичен материал, който остава неизползван по време на ин витро оплождане цикъла. Наистина, при ниски температури, ембрионите се съхраняват в жизнеспособна държава не се нарушава тяхната метаболитна активност и ефективност, която е имплантиране на ниво, не е по-ниско в програми за оплождане ин витро, използвайки пресни биоматериал проби.

В света на медицинска практика, се е натрупал значителен опит в постигането на бременност от размразяване и оплождане на зрели яйцеклетки. Доскоро се използва като криопротектор реагент диметилсулфоксид (DMSO) и схема на бавно охлаждане и бързо размразяване. Впоследствие стомана прилага пропандиол (PrOH), а след това - комбинация пропандиол и захароза, която се превърна в първия търговски кит за яйцеклетка замразяване и размразяване.

проблеми клетка замразяване

В същото време, клетка замразяване технологията все още не е достатъчно развит, и по този начин нейното усъвършенстване е неотложен проблем, който изисква по-нататъшни решения. Трудности криоконсервация на зрели яйцеклетки са свързани:

• със значително количество от своя цитоплазмата;
• високо съдържание на вода в клетката;
• състоянието на хромозомите в метафаза на мейоза са много чувствителни към температура и осмотични вибрации чрез замразяване, и (много важно) размразяване.

Основната причина за увреждане на клетките по време на замразяване и размразяване е образуването на ледени кристали в клетката. Изглежда, че клетъчна дехидратация може да реши този проблем, но премахването на твърде много вода също се счита за разрушителни клетки.

Видео: Ембрионна криоконсервация: защо тази процедура

Известно е, че точката на замръзване на водата, която съдържа различни йони под 0 ° С и зависи от тяхната концентрация. В криоконсервация клетки изложени част от водните молекули на кристализация, че повишава концентрацията и по този начин намалява температурата на замръзване.

Увеличението на клетъчно ниво осмотичното налягане също има разрушителен ефект. Днес недвусмислено доказано, че клетъчно увреждане фактор не е ниска температура, и ледени кристалчета се образуват в термичната зона, определена от замразяване и размразяване.

Какъв е процесът на замразяване на клетките с помощта cryotechnology?

Процес замразен материал се извършва основно по два начина:

1. Бавно метод за криоконсервация.
2. Небалансирано метод криоконсервация, който се състои от ултрабързи криоконсервация и встъкляване.

Бавно метод криоконсервация, извършва на етапи, най-често срещаният метод за замразяване на човешки ембриони. С бавно охлаждане, тя се провежда поетапно клетъчна дехидратация, която помага за намаляване на риска от големи вътреклетъчни ледени кристали.

Поради осмотични градиент криопротектанти "извади" от водни клетки, който замръзва в междуклетъчното пространство. С ръка обшивка (засяване) се използва за предотвратяване на спонтанно образуване на лед. Форцепс докосват слама, който съдържа разтвор на клетките при температура -6,5 ° С, последвано от десет минути експозиция при температурата на кристализация.

Следователно, при температура от -35 ° С ембрионите се поставят в течен азот, където крайната стъпка на замръзване и където ембрионите могат да се съхраняват до използването им.

Въпреки това, рискът от повреда поради ембриони интер- и вътреклетъчен кристализация е достатъчно голям. В допълнение, бавен метод криоконсервация се извършва със специално оборудване, което струва висока.

Методи за приготвяне на замразени ембриони за оплождане ин витро

свръхвисокоскоростни методи криоконсервация са както следва. Ембрионите, които бяха в диметилсулфоксид и захароза разтвор се прехвърлят в течен азот фини ледени кристали се образуват след това се стопи при по-ниски температури.

Метод на встъкляване (лат Vitrum -. Стъкло) е да се превърне течността метод твърдо състояние води до екстремно повишаване на вискозитета по време на охлаждане клетки, не кристализира, т.е. Витрификация - замразяване без образуването на ледени кристали. В встъкляване, а не само на процеса на охлаждане е значително опростена, но рискът изчезва химически и физически щети, причинени от интер- и вътреклетъчен кристализация.

Този метод се провежда при използване на течност встъкляване, която се състои от два вида криозащитни:

Видео: IVF стъпка по стъпка. замразяване на ембриони

• разтвор с висока концентрация на криопротектор, който може да проникне в клетъчната мембрана (propilenglyukol, глицерол, етилен гликол);
• malopronikayuschego криопротектор разтвор за дехидратация клетки (polietilenglyukol, Ficoll, захароза).

криопротектор концентрация е толкова висока, че твърде бързо охлаждане до вискозитет -196 ° С на течността се увеличава значително.

Важно е, че за остъкляването, за разлика от бавното криоконсервиране, използват едни и същи решения, независимо от етапа на развитие на яйцеклетките или ембрионите. Практически процес витрификация е поставянето на яйцеклетки или ембриони за витрификация на околната среда, но и за много кратко време, за да се избегне токсични ефекти поради допълнително свръхбързи замръзване.

По този начин, метод витрификация не изисква значителни логистични разходи, и е удобен за практическо използване. При охлаждане е значително опростен процес встъкляване, което предотвратява развитието на физични и химични повреди клетки се дължи на образуването на интер- и вътреклетъчни кристали.

Видео: Само за ин витро: криоконсервация. Кой има нужда? банкови ооцити

Като заключение, бихме искали да кажем, че стъкловидното ин витро оплождане може да се разглежда като алтернатива на бавно замразяване протокол. Надяваме се, че в близко бъдеще ще бъде ясно доказано предимство пред бавно замразяване витрификация.